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少动鞘氨醇单胞菌ZX4儿茶酚2，3-双加氧酶基因的克隆与表达
2021-02-22 12:01:07热度:114°C
应用PCR方法克隆了少动鞘氨醇单胞菌（Sphingomonas-paucimobilis）ZX4菌株的儿
茶酚2，3一双加氧酶基因（c250-ZX4）。核苷酸序列测定与分析表明，该基因片段全长924 bp且具有一个完整的阅读框，编码306个氨基酸残基。该基因与已报道的来自菌株S．yanoikuyae B1和Sphingomonas sp、KMG425的xylE基因（编码产物均为C230）具有较高的核酸序列同源性，分别为94．37％和94．05％。通过胁以Ⅲ和Xho I两个限制性酶切位点将该基因连接到质粒pET30（a）＋上得到重组表达质粒pET-S3，并在E．coli BL21进行了表达，得到了42．3kD的融合蛋白。酶活测定发现该基因工程菌株的发酵产酶活力明显高于出发菌株。
完成机构：[1]上海市农业科学院环境科学研究所,上海201106 [2]浙江大学生命科学院,杭州310029
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